EPIDEMIOLOGÍA MOLECULAR DE LA TUBERCULOSIS MULTIRRESISTENTE EN ESPAÑA DE 1998 A 2005. RESULTADOS PRELIMINARES.
P. Gavín1, M. S. Jimenez2, L. Herrera2, M. J. Iglesias3, M. A. Lezcano1, M. J. Revillo1, C. Lafoz3, A. Cebollada3 , C. Martín3 y S. Samper1, en representación del Grupo Español de Trabajo sobre Tuberculosis
1Servicio de Microbiología, Hospital Universitario Miguel Servet, Zaragoza. 2Instituto de Salud Carlos III, Madrid. 3Dpto. de Microbiología, Medicina Preventiva y Salud Pública, Universidad de Zaragoza, Zaragoza.

Material y métodos: En 1998 se crea la “Red Española de Vigilancia de la tuberculosis multirresistente”. Las cepas se caracterizan genéticamente mediante los métodos estandarizados RFLP-IS6110 y Spoligotyping. Las mutaciones más frecuentes en el gen rpoB se estudian mediante Rifotyping o secuenciación de un fragmento de 432 pb del gen. Para el gen katG se realiza una PCR-RFLP con la enzima de restricción MspI. En 2004 se introduce de forma sistemática la técnica MIRU-VNTR (12 loci clásicos), al principio de forma manual y posteriormente de manera automatizada (secuenciador MegaBACE, Amersham) Los patrones moleculares se analizan con el programa BioNumerics 3.0.

Resultados: Desde Enero de 1998 a diciembre de 2005 se registraron 425 aislados clínicos, uno por paciente y año, en la Base de Datos Nacional de TB MR de la Universidad de Zaragoza. Se tiparon 354 aislados mediante la técnica de RFLP-IS6110, 398 mediante spoligotyping y 114 por la técnica MIRU-VNTR (los correspondientes a los años 2003 a 2005) Un total de 113 aislados se agruparon en 24 clusters definidos por idénticos RFLP y mutaciones en rpoB y katG. El 36% de los aislados en cluster presentaron la mutación Ser 315 Thr en katG mientras que Ser 531 Leu fue la mutación más frecuente en el gen rpoB con el 37% de los casos. El genotipo típico de la familia Beijing se presentó en 18 aislados, 12 de los cuales procedían de pacientes inmigrantes. No se han registrado en los últimos tres años nuevos casos de afectados por la cepa de M. bovis MR (cepa B) causante del brote en España que afectó a más de 100 personas. Un total de 85 aislados fueron estudiados con las dos técnicas: VNTR-MIRU y RFLP, que detectaron 16 clusters (57.6%) y 11 clusters (42.3%) respectivamente. Destacar el importante incremento en los últimos años de los pacientes inmigrantes con TB MR que pasan a ser el 48% del total en los años 2004 a 2005 frente al 18% en 1998 a 2003.

Conclusiones: Actualmente la TB MR en España no supone un grave problema de Salud Pública, si bien el número de casos se mantiene constante en el tiempo y estamos asistiendo a un cambio en la población afectada a causa del fenómeno de la inmigración. La técnica MIRU-VNTR, presenta grandes ventajas metodológicas en cuanto a cantidad de ADN necesario, rapidez e interpretación de resultados, sin embargo, es necesario la estandarización de los loci a emplear para alcanzar mayor capacidad discriminativa.

Este trabajo ha sido subvencionado por el proyecto de investigación FIS 03/0743.